中国猪业 ›› 2024, Vol. 19 ›› Issue (6): 76-82.doi: 10.16174/j.issn.1673-4645.2024.06.010

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猪圆环病毒2型PCR检测方法建立及检测限探讨

李思雨,王翠,马涛,覃艳然,卢丽飞,许宗丽,梁兆斌,刘文波,覃一峰,严斯刚,韦祖樟   

  • 出版日期:2024-12-25 发布日期:2024-12-25

  • Online:2024-12-25 Published:2024-12-25

摘要: 近年来,猪圆环病毒(Porcine circovirus, PCV)在自然界中的流行毒株越来越多样,为更便捷地检测自然界中的猪圆环病毒,本研究建立了一种检测PCV2 流行毒株感染的PCR 方法,为PCV2 流行病学调查提供技术支持。本研究根据GenBank 中公开的PCV2 全基因序列,设计特异引物,经过构建阳性质粒、灵敏度试验、特异性试验,建立了PCR 检测方法。结果显示,建立的PCR 方法检测极限为500 copies/μL,以猪圆环病毒2 型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪塞内卡病毒、猪盖塔病毒、猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病病毒和猪圆环病病毒3 型的cDNA/DNA 作为模板,用该方法扩增的猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪塞内卡病毒、猪盖塔病毒、猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病病毒和猪圆环病病毒3 型等的结果均为阴性,表明建立的方法特异性良好;应用该方法检测了疑似猪圆环病毒组织样品279 份,检测到猪圆环病毒2 型阳性样品118 份,PCV2 的阳性率为42.29%。本研究成功建立了检测PCV2 感染的PCR 方法,为进一步流行病学调查和生物学特性研究奠定了基础。

关键词: 猪;圆环病毒2 型;PCR 检测;流行病学;检测限;PCV;基因序列

中图分类号:  S828;S851.3

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