摘要： 为快速、便捷地检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪Delta冠状病毒(PDCoV)混合感染病原,试验根据Genbank收录的2种病毒的M基因序列,分别设计2对引物,通过对RT-PCR反应优化,最终建立了PEDV和PDCoV二重RT-PCR扩增检测方法,验证其特异性和敏感性,将该方法应用于临床病料的检测。结果显示,利用建立的二重RT-PCR方法对PEDV和PDCoV进行扩增,分别获得750 bp和372 bp的特异性目的条带,最佳退火温度为56℃。扩增未见CSFV、PRV、PPV病毒基因片段,而能够同时扩增出PEDV和PDCoV目的基因片段。PEDV/PDCoV 2种病毒混合核酸最小检测量为0.1 ng。对临床疑似病料检测结果符合率为100%。表明建立的PEDV/PDCoV二重RT-PCR方法具有较好的特异性、灵敏性和临床适用性,为PEDV、PDCoV的快速、准确临床诊断和有效防控提供了检测技术手段。